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        1. 【返回列表頁】

          貨號:Cat. No.:MC012   Size:100ul X 20支

          ——產品介紹

                 SM-Stbl3 Competent Cell 是華麥生物研發的用特殊化學方制備的Stbl3感受態細胞,來源于HB101 E. coli strain,是慢病毒載體系統推薦使用的菌株,可有效抑制長片段末端重復區的重組,降低低錯誤重組的概率。轉化效率可達108-109菌落數/ug(質粒pUC19),是實現DNA克隆,文庫構建等實驗的理想產品。

          ——產品特色

          Ø1、 可實現含有重組序列等不穩定質粒轉化。

          Ø2、 效率高:可達到108-109cfu/ug pUC19 DNA。

          Ø3、 穩定性好:-70度冰箱可保存一年時間。

          SM-Stbl3基因型

          F–mcrBmrrhsdS20(rB–,mB–)recA13supE44ara-14galK2lacY1proA2rpsL20(StrR) xyl-5λ--leu mtl-1

          —— 操作步驟

          1.  取100ul冰浴上融化的Stbl3感受態細胞,加入目的DNA(質?;蛘哌B接產物),輕輕混勻,在冰浴中靜置30分鐘。

          2.  42℃水浴中熱激30秒,然后快速將離心管轉移至冰浴中2分鐘,該過程不要振蕩離心管。

          3. 向每個離心管中加入900ul無菌的SOC或者LB培養基(不含抗生素),輕柔地混勻后置于37℃,200rpm搖床上孵育1小時,使細菌復蘇。

          4. 根據實驗要求,吸取不同體積或者離心濃縮后的已轉化的感受態細胞加入含相應抗生素的LB瓊脂培養基上,將細胞均勻涂開,將平板置于37℃至液體被稀釋,平板倒置,過夜培養。

          —— 保存條件

                  -70℃保存,干冰運輸,至少1年有效。

          ——注意事項

          1.  剛化凍的感受態細胞效率最高,避免反復凍融;

          2.  轉化整個過程要輕柔,避免移液器吹吸。


           

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